期刊简介
本刊1975年创刊，主管单位为四川省教育厅，主办单位为川北医院。已入编多种数据库和期刊群。学报主编由学院院长康健教授兼任，副主编由学院副院长李健教授及学院党委副书记李成军教授兼任，现任编辑部主任为李宾中教授。
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首页>川北医学院学报杂志
- 杂志名称：川北医学院学报杂志
- 主管单位：四川省教育厅
- 主办单位：川北医学院
- 国际刊号：1005-3697
- 国内刊号：51-1254/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：四川省优秀学报期刊收录：上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中)
人重组烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶2的表达、纯化及酶活力测定
王之涵；任力；赵亮
关键词：烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶-2, 纯化, 酶活力, 轴突退变, 神经保护
摘要：目的:通过大肠杆菌体系诱导表达烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶2(NMNAT2),并测定纯化的重组NMNAT2酶蛋白催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)生物合成的酶比活力.方法:在大肠杆菌BL21(DE3)体系优化条件下诱导表达NMNAT2重组蛋白,利用Ni-NTA Superflow Kit进行目的蛋白的纯化,Western blot法进行鉴定,并通过酶联荧光法测定其催化产物NAD,测定其酶活性.结果:人重组质粒NMNAT2-pET-24a可以在大肠杆菌BL21(DE3)体系中诱导表达.诱导条件为:LB培养液(卡那霉素,15 μg/mL)中37 ℃,IPTG(1.0 mM)诱导表达4 h.纯化获得的NMNAT2重组蛋白具有较高的酶活性.结论:NMNAT2-pET-24a可在大肠杆菌BL21(DE3)体系中稳定表达,优化条件下可获得较高活性的纯化NMNAT2重组蛋白,可用于神经保护功能及酶蛋白的活性调控研究.
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